酶標儀（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）是一種常用的生物化學分析技術，用于檢測和測量目標物質（如蛋白質、抗體、荷爾蒙等）的存在和濃度。其原理基于酶和抗體的特異性結合，通過酶的催化作用和檢測酶標記物的信號來實現目標物質的定量分析。

　　酶標儀的原理分為直接ELISA、間接ELISA、競爭ELISA和夾心ELISA等不同類型，這里以間接ELISA為例進行說明：

　　1. 涂層：首先，在酶標板上涂覆目標物質的抗原或抗體。通常使用多孔性的微孔板，將抗原或抗體溶液加入孔中，并通過孔底的吸附作用將其固定在微孔板上。

　　2. 阻斷：在涂層后，添加一種非特異性的蛋白質（如牛血清蛋白、雞蛋清蛋白等）作為阻斷劑，阻止未結合的部分。

　　3. 樣品加入：加入待測樣品，樣品中的目標物質（如抗體）與固定在微孔板上的抗原或抗體發生特異性結合。

　　4. **次酶標記抗體加入：加入與待測樣品中的目標物質特異性結合的酶標記抗體。這種抗體通過與目標物質結合形成復合物，將酶引入到反應體系中。

　　5. 洗滌：洗滌酶標板，去除未結合的物質。

　　6. 底物加入：加入底物，底物與酶反應產生可測量的信號。常用的底物是一種具有熒光、發光、顏色變化等特性的物質，酶的催化作用使其產生可觀察到的信號。

　　7. 反應終止：通過加入反應終止劑或調整pH值等方法停止酶的活性。

　　8. 信號檢測：使用酶標儀測量底物反應產生的信號強度，通常通過光學讀數來檢測熒光、發光或吸光度等信號。

　　根據測量結果的變化，可以確定待測樣品中的目標物質的存在和濃度。酶標儀的使用方法一般包括以下步驟：

　　1. 準備試劑：準備好所需的試劑，包括抗原或抗體、酶標記抗體、底物等。

　　2. 涂層：將抗原或抗體涂覆在酶標板上，使其與微孔板的孔底相互作用。

　　3. 阻斷：添加阻斷劑，防止孔底的非特異性結合。

　　4. 樣品處理：處理待測樣品，如稀釋、加入適當的緩沖液等。

　　5. 樣品加入：將待測樣品加入涂有抗原或抗體的孔中。

　　6. 酶標記抗體加入：加入與目標物質特異性結合的酶標記抗體。

　　7. 洗滌：用緩沖液洗滌酶標板，去除未結合物質。

　　8. 底物加入：加入底物。